急性白血病斑马鱼模型

一、疾病名称

急性髓性白血病 (Acute myeloid leukemia, AML)

二、临床发病机制及症状

人急性白血病是一类造血干细胞的恶性克隆性疾病。外周血可见数量不等的原始和幼稚细胞，约 50％的患者血小板低于正常值，晚期血小板往往极度减少。发病时骨髓中异常的原始细胞及幼稚细胞（白血病细胞）大量增殖并抑制正常造血，广泛浸润肝、脾、淋巴结等各种脏器。表现为贫血、出血、感染和浸润等现象。其发病因素：1.生物因素：病毒感染和免疫功能异常；2.物理因素：电离辐射；3.化学因素：长期接触化学物质如苯类化合物、一些药物如乙亚胺类化合物、抗肿瘤药物烷化剂和拓扑异构酶 II 抑制剂等有致白血病作用。4.遗传因素：家族性白血病约占白血病的千分之七。临床症状有：突然高热、出血、紫癜、脸色苍白，凝血异常。

三、 模式动物

斑马鱼(Zebrafish, Danio rerio) AB 或 TU 野生型品系均可。

1. 实验动物

野生型斑马鱼 AB 或 TU 品系。

2. 造模化合物

二乙基亚硝胺 (Diethylnitrosamine, DEN)。

3. 模型分析指标

（1） 检测方法将斑马鱼成体暴露于 200 μg/ml 的 DEN 溶液中 4 天，洗涤后，心脏取血，涂片、固定、用瑞氏-姬姆萨染色液染色，显微镜下观察、拍摄。进行血细胞分类计数、血涂片细胞形态学的观察。

（2） 病理诊断常规血液病的最后确诊有赖于实验室检查：血细胞分类计数和血涂片细胞形态学的观察等。以血涂片分类检测到原始和幼稚细胞、血栓细胞减少为诊断指标。

血象观察和血细胞分类：以野生型斑马鱼为对照，DEN 处理斑马鱼成体后，心脏取血，外周血血细胞分类计数显示：幼稚性白细胞明显增多，包括原始性、幼稚性的前体白细胞；血栓细胞（相当于人类血小板）明显减少（图 1、图 2）。结果提示: DEN 可诱导斑马鱼急性白血病。

图 1. DEN 处理的斑马鱼外周血细胞主要类型的图像

图 2.DEN 对斑马鱼外周血细胞分类（除外红细胞）的影响

动物症状观察：

表现为体重减轻、弓背竖毛，在回输后的一个月后死亡。